| Introdução. A coccidioidomicose é uma infecção sistêmica causada pelos fungos dimórficos Coccidioides immitis e Coccidioides posadasii, que acomete homens e outros animais, sendo essa infecção endêmica em regiões semi-áridas das Américas do Norte, Central e América do Sul. O diagnóstico da doença consiste em técnicas microbiológicas como exame direto e cultura, porém esses métodos trazem riscos ao manipulador, sendo o imunodiagnóstico uma ferramenta auxiliar no diagnóstico da doença. Este trabalho teve como objetivo a produzir diversas frações protéicas de cepas de C. posadasii na busca de possíveis alvos antigênicos passíveis de uso no imunodiagnóstico da doença.
Métodos. A técnica utilizada para a obtenção das frações antigênicas empregou sulfato de amônio para a precipitação dos antígenos. A metodologia de imunodiagnóstico utilizada para a avaliação da imunoreatividade da fração antigênica foi Imunodifusão Radial Dupla. Ademais, a técnica de Western blotting foi utilizada para detecção da banda imunodominante de 60 kDa nas frações antigênicas e, a técnica de SDS-PAGE foi utilizada para verificação do perfil de bandas entre o Antígeno total extraído de várias cepas de Coccidioides posadasii.
Resultados. Todos os 10 soros testados com as frações antigênicas extraídas da cepa CEMM 01-6-85 foram reconhecidos pelo Antígeno total. Os 6 soros testados com o Antígeno total extraído da cepa CEMM 05-2-63 reconheceram o antígeno. A fração 60-90% revelou banda imunoreagente de aproximadamente 30 a 40kDa reconhecida por soro de pacientes com coccidioidomicose, porém apresentou reação cruzada com alguns soro de pacientes com histoplasmose. Além disso, a banda imunodominante nos antígenos extraídos das 8 cepas, foi a de peso molecular 100 kDa, que esteve presente tanto nos antígenos obtidos de cepas ambientais, como obtidos de cepas clínicas. Conclusão. Diante dos resultados, concluimos que o antígeno total poderá ser uma futura alternativa do imunodiagnóstico na região. |